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 二氧化鈦是家禽消化試驗(yàn)中常用的外源指示劑之一, 試驗(yàn)采用分光光度計(jì)法測定了家 禽飼料和食糜中二氧化鈦含量。取 0.15 g飼料或 0.1 g凍干食糜樣品溶解于 7.4 mol/l 的硫酸溶液中, 然后加入 30%雙氧水, 溶液呈現(xiàn)典型的桔黃色。取一部分溶液于 410 nm波長比色, 測定溶液的吸光度 值, 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算二氧化鈦含量。結(jié)果表明, 該方法的平均回收率為 97.35%。

指示劑法是測定家禽飼料養(yǎng)分消化率的常用方 法之一。該方法的關(guān)鍵在于選擇適宜的指示劑。理想 的指示劑應(yīng)該具有穩(wěn)定的化學(xué)性質(zhì), 不能被動(dòng)物消 化、吸收和分解, 同時(shí)也不與腸道內(nèi)的微生物相互作 用, 但必須在消化道內(nèi)隨食糜均勻流動(dòng), 重要是要 有較高的回收率和檢測靈敏度。目前較常用的外源指 示劑有三氧化二鉻、二氧化鈦和酸不溶灰分。 二氧化鈦化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定, 不溶于水和稀酸, 每天 攝入 2~3 g對動(dòng)物無害, 并能*排泄到糞中(95%以 上的回收率)。與其它指示劑相比, 二氧化鈦具有回收 率變異較小, 不改變?nèi)占Z顏色, 無致癌性, 可合法添加 (AAFCO,1996), 檢測靈敏度高, 在飼料中的添加量低 (一般為 0.2%~0.5%)等特點(diǎn), 因而是一種較為理想的 外源指示劑。

本試驗(yàn)旨在建立分光光度法測定家禽飼料和食 糜中二氧化鈦含量的方法, 便于今后采用二氧化鈦指 示劑法準(zhǔn)確測定飼料的養(yǎng)分消化率。
1 材料與方法

1.1 測定原理 TiO2 在熱的濃硫酸中溶解生成硫酸鈦酰, 硫酸鈦 酰與 H2O2 可生成較穩(wěn)定的呈桔黃色的[TiO(H2O2)]2+, 在一定濃度范圍內(nèi)其在 410 nm 波長下的吸光度與 TiO2 含量呈線性關(guān)系。
TiO2+H2SO4=TiOSO4+H2O TiO2++H2O2=[TiO(H2O2)]2+(桔黃色)

1.2 儀器 分光光度計(jì)(備有 1 cm比色皿); 分析天平(感量 0.000 1 g); 電爐; 容量瓶(100、 1 000 ml); 刻度移液管 (1、 2、 5、 10、 20 ml);燒杯(100、 200 ml);試劑瓶(1 000 ml)。

 1.3 試劑 硫酸、 30%過氧化氫溶液、二氧化鈦, 以上均為分 析純。 1.3.1 鈦標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.5 mg/ml) 準(zhǔn)確稱量 250 mg(至 0.000 1 g)二氧化鈦于 燒杯中, 燒杯中加入 100 ml 濃硫酸, 加熱至接近沸 騰。燒杯中內(nèi)容物轉(zhuǎn)移至 500 ml 容量瓶中, 用少許蒸 餾水沖洗燒杯。容量瓶中再緩緩加入 100 ml 濃硫酸, 用蒸餾水稀釋并定容至 500 ml。 1.3.2 7.4 mol/l 硫酸溶液 400 ml 濃硫酸緩慢注入盛有約 400 ml 蒸餾水的 1 000 ml 燒杯中, 并且用玻璃棒不斷攪拌, 待溶液冷 卻后, 轉(zhuǎn)移至 1 000 ml 容量瓶中, 用蒸餾水定容。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 用刻度移液管取鈦標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.5 mg/ml)0、 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9、 10 ml,分別注入 11 只 100 ml 容量瓶中。 在上述容量瓶中, 依次加入 7.4 mol/l 硫酸溶液 10、 9、 8、 7、 6、 5、 4、 3、 2、 1、 0 ml, 搖勻后, 用移液管各加入 20 ml 過氧化氫溶液(30%),后用蒸餾水定容至 100ml 作為樣品的標(biāo)準(zhǔn)液。用不含鈦的樣品作空白調(diào)零。 在分光光度計(jì)上, 以 410 nm為工作波長, 比色測 定各瓶中樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度。吸光度和鈦濃度呈 線性關(guān)系的大濃度為 0.05 mg/ml。根據(jù)測定吸光度 及鈦濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

 1.5 試驗(yàn)步驟量約 0.1 g 凍干食糜樣品或 0.15 g 飼料樣品 (做平行)于瓷坩鍋中, 至電爐上小心炭化至無煙后, 于 茂福爐 580 ℃灼燒 13 h。冷卻后, 加入 7.4 mol/l 硫酸 溶液 10 ml。瓷坩鍋置于電爐上加熱, 樣品緩慢沸騰, 直至*溶解。冷卻后,坩鍋內(nèi)內(nèi)容物用 25 ml 蒸餾水 沖洗, 轉(zhuǎn)移至 100 ml 容量瓶中。容量瓶中加入 20 ml H2O2(30%), 蒸餾水定容至 100 ml。定性濾紙過濾, 取 部分溶液在 410 nm處比色。 1.6 計(jì)算公式 a(%)=10b/m× 100 式中:a—— —樣品中 TiO2 含量(%); b—— —在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得樣品溶液中鈦濃度 (mg/ml); m—— —樣品質(zhì)量(g)。
2 結(jié)果
2.1 鈦濃度測定的標(biāo)準(zhǔn)曲線
鈦濃度測定的標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖 1。鈦濃度和吸光度 的標(biāo)準(zhǔn)曲線為 y=9.164 7x,R2=0.999 7。2.2 試驗(yàn)結(jié)果 測得的家禽飼料和食糜中二氧化鈦含量及回收 率見表 1。
由表 1 可以看出, 二氧化鈦的回收率范圍在 95.12%～ 98.80%之間,平均回收率為(97.35± 1.07)%。TiO2 的 3 個(gè)添加量 0.01、 0.02、 0.03 的平均回收率分別為 (98.35± 0.69)%、 (97.31± 0.12)%、 (96.39± 1.07)%。回收率 是判斷分析方法準(zhǔn)確度的重要標(biāo)準(zhǔn)。通過本次測定的 結(jié)果來看, 達(dá)到了分析測定的要求, 表明用分光光度 計(jì)法可以準(zhǔn)確測定家禽飼料和食糜中二氧化鈦含量。 總之, 該方法制樣過程簡單, 試驗(yàn)過程易于操作 和控制; 準(zhǔn)確性高、重復(fù)性好。是一種可靠的家禽飼料 和食糜中二氧化鈦定量測定方法